Levantamento sorológico de brucelose em bovinos monitorados no estado da Bahia / Serological survey of brucellosis in cattle monitored in the estate of Bahia

A brucelose é uma doença bacteriana de grande importância para a economia pecuária e para a saúde pública por se tratar de uma zoonose. É uma doença infecto-contagiosa que tem com agente etiológico bactérias do gênero Brucella. Em bovinos, as espécies do gênero é a Brucella abortus, que são cocobacilos gram negativo, intracelulares facultativos, imóveis e não esporulado. A infecção apresenta evolução crônica e acomete animais de todas as idades, sendo mais frequente em indivíduos sexualmente maduros. O objetivo desse trabalho é investigar, por meio da sorologia para brucelose bovina, utilizando a técnica do ELISA indireto, amostras de animais reagentes abatidos em frigoríficos inspecionados no estado da Bahia. Foram utilizados 666 animais, selecionados aleatoriamente no momento do abate. O sangue foi coletado com finalidade de obtenção de soro, todas as amostras foram submetidas à prova de triagem do Antígeno Acidificado Tamponado (AAT), prova do 2mercaptoetanol (2-ME) e ELISA Indireto. Das amostras reagentes no teste do AAT, obteve-se uma prevalência estimada em 1,2%. A prevalência no teste do ELISA foi de 13,21% (n=86). Esse resultado sugere a ocorrência de falsos negativos quando se utiliza a prova do antígeno acidificado tamponado.

Brucellosis is a bacterial disease of great importance to the livestock economy and to public health because it is a zoonosis. It is an infectious disease that has etiologic agent with bacteria of the genus Brucella. In cattle, the species of the genus Brucella is Brucella abortus that are gram negative, facultative intracellular, real estate and not sporulated. The infection presents chronic and affects animals of all ages, being more frequent in sexually mature individuals. This study aimed to investigate through serology for brucellosis, using the technique of indirect ELISA, samples from positive animals slaughtered in slaughterhouses inspected in the state of Bahia. A total of 666 animals were used, randomly selected at the time of slaughter. Blood was collected in order to obtain serum, all samples were subjected to a screening test Antigen Buffered Acidified (AAT), proof of 2-mercaptoethanol (2-ME) and Indirect ELISA. Of reagents in the test samples of AAT obtained an estimated prevalence of 1.2%. The prevalence in the ELISA test was 13.21% (n = 86). This result suggests the occurrence of false negatives when using the buffered acidified antigen test.

Análise da correlação dos índices de estrutura e recursos humanos do serviço veterinário oficial em 2019 e as incidências acumuladas (2017 ­ 2019) de doenças de notificação obrigatória em bovinos e equinos no Brasil / Analysis of the correlation between the structure and human resources indexes of the official veterinary service in 2019 and the accumulated incidences (2017 ­ 2019) of notifiable diseases in cattle and horses in Brazil

As doenças de notificação obrigatória em bovinos podem gerar impactos sociais e econômicos significativos na cadeia pecuária brasileira, além de consequências negativas no mercado internacional devido a embargos sanitários. Para auxiliar no entendimento de como um sistema de vigilância epidemiológica com mais recursos pode gerar mais credibilidade para o país, foram realizadas análises de correlação entre a notificação de doenças e a estrutura veterinária disponível nos Órgãos Executores de Sanidade Agropecuária (OESAs), a partir dos dados contidos no Sistema Nacional de Informação Zoossanitária (SIZ), entre os anos de 2017 e 2019. Com base nos dados do serviço veterinário, foram produzidos o Índice de Estrutura Física Oficial (IEFO) e o Índice de Recursos Humanos do Serviço Oficial (IRHSO). Foi realizada análise de correlação entre a notificação de doenças de bovinos com a capacidade de estrutura física e recursos humanos de vigilância epidemiológica disponíveis no Serviço Veterinário brasileiro. Os estados AP, RR e SC foram os que mais notificaram brucelose e tuberculose no período e estão entre os melhores índices de estrutura e recursos humanos do país. A análise dos índices mostrou que a raiva não possui correlação significativa com estrutura e recursos humanos do serviço, entretanto, brucelose e tuberculose possuem correlação positiva com estrutura veterinária oficial disponível para a vigilância em bovinos. Portanto, melhorias na estrutura podem refletir no incremento dos índices de notificação das doenças de bovinos, assim como na qualidade de suas informações.

Notifiable diseases in cattle can generate significant social and economic impacts on the Brazilian livestock chain, in addition to impacts on the international market due to sanitary embargoes. To help understand how an epidemiological surveillance system with more resources can generate more credibility for the country, correlation analyzes were carried out between the notification of diseases and the veterinary structure available in the Executing Bodies of Agricultural Health (OESAs), based on the data contained in the National System of Zoosanitary Information (SIZ), between the years 2017 to 2019. Based on public data from the veterinary service, the Official Physical Structure Index (IEFO) and the Official Service Human Resources Index (IRHSO) were produced. Correlation analysis was performed between the notification of bovine diseases with the capacity of physical structure and human resources for epidemiological surveillance available in the Brazilian Veterinary Service. AP, RR and SC were the states that most notified brucellosis and tuberculosis in the period and are among the best indices of structure and human resources in the country. The analysis of correlation indices showed that the rabies disease does not have a significant correlation with the structure and the human resources of the service, however, brucellosis and tuberculosis does have a positive correlation with the official veterinary structure available for surveillance in cattle. Therefore, Improvements in the structure can reflect in the increase of the notification rates, as well as in the quality of its information.

Seropositividad de Brucella abortus en ganado bovino de Aguazul- Casanare / Seropositivity of Brucella abortus in cattle from Aguazul- Casanare

Resumen Introducción. La Brucelosis bovina, es una enfermedad bacteriana e infecto contagiosa, causada por Brucella abortus. Se transmite a través de la ingestión de forrajes y aguas contaminadas con descargas vaginales infectadas, que conlleva a una patología del sistema reproductor en bovinos, que impactan la sanidad pecuaria y la economía de la agroindustria. Objetivo. Evaluar el comportamiento de la brucelosis bovina en el municipio de Aguazul, Casanare (Colombia) y los factores asociados al desarrollo de esta enfermedad. Metodología. Estudio descritptivo de 26.187 muestras de suero sanguíneo de ganado bovino evaluadas, que corresponden a 260 predios del municipio de Aguazul. Se empleó técnicas serológicascomo rosa de bengala, fluorescencia polarizada y ELISA competitiva para la evaluación de positividad a Brucella abortus y se evaluaron las pérdidas económicas asociadas a positividad en los ensayos de laboratorio. Resultados y conclusiones. La positividad a brucelosis bovina correspondió al 1%, que corresponde a hembras menores de 24 meses de edad y entre 37 a 48 meses y, machos entre los 57 a 68 meses de edad. Se sugiere consolidar esfuerzos en investigación para evaluar los factores que contribuyen a la seropositividad en el ganado y el riesgo para la propagación y mantenimiento de la enfermedad.

Abstract Introduction. Bovine brucellosis is a contagious bacterial and infectious disease caused by Brucella abortus. It is transmitted through the ingestion of forage and water contaminatedwith infected vaginal discharges, which leads to a pathology of the reproductive system inbovines, which impacts livestock health and the economy of agribusiness. Aim. To evaluatethe behavior of bovine brucellosis in the municipality of Aguazul, Casanare (Colombia) and the factors associated with the development of this disease. Methodology. Descriptive study of 26,187 bovine blood serum samples evaluated, corresponding to 260 farms in the municipality of Aguazul. Serological techniques such as rose bengal, polarized fluorescence, and competitive ELISA were used to evaluate positivity to Brucella abortus and the economic losses associated with positivity in laboratory tests were evaluated. Results and conclusions. The positivity to bovine brucellosis corresponded to 1%, which corresponds to females under 24 months of age and between 37 to 48 months and males between 57 to 68 months of age. It is suggested to consolidate research efforts to evaluate the factors that contribute to seropositivity in cattle and the risk for the spread and maintenance of the disease

Inquérito sorológico de brucelose em machos e fêmeas bovinas em fazendas do Estado de Mato Grosso do Sul / Serological survey of brucellosis in males and females of cattle in the State of Mato Grosso do Sul

Objetivou-se avaliar a ocorrência de animais soro reagentes à brucelose bovina em fazendas localizadas no Estado de Mato Grosso do Sul, por meio de exame sorológico utilizando o Antígeno Acidificado Tamponado (AAT) e discutir as possíveis diferenças entre as soroprevalências de fêmeas e machos. Foram avaliados, a partir do teste de triagem com Antígeno Acidificado Tamponado (AAT), 724 bovinos da raça Nelore, sendo 274 machos e 450 fêmeas, provenientes de oito propriedades com histórico de problemas reprodutivos. O teste foi procedido conforme o protocolo determinado pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA). Os resultados demonstraram baixa soroprevalência da doença nos bovinos testados, sendo detectada prevalência para a doença de 1,10% nos machos e 2,88% nas fêmeas.Quando se considera o touro isoladamente nos rebanhos, pode-se perceber que a fertilidade é muito mais importante nos machos do que nas fêmeas individualmente, uma vez que os touros podem se acasalar com um número muito maior de fêmeas, seja na monta natural ou na inseminação artificial, demonstrando a importância do inquérito epidemiológico na população geral, principalmente nos machos. A maior frequência da doença foi encontrada nas fêmeas podendo estar relacionada à infecção por Brucella spp. no ambiente decorrente de parto ou aborto tornando as fêmeas transmissoras permanentes da doença.

The objective of this study was to evaluate the occurrence of seroreactive animals to bovine brucellosis in farms located in the State of Mato Grosso do Sul, by means of a serological examination using the Acidified Buffered Antigen (AAT) and to discuss the possible differences between the seroprevalence of females and males. A total of 724 Nellore cattle, 274 males and 450 females, from eight farms with a history of reproductive problems, were evaluated using the screening test with Acidified Buffered Antigen (AAT). The test was carried out according to the protocol determined by the Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supply (MAPA).The results showed a low seroprevalence of the disease in the tested cattle, with a prevalence of 1.10% in males and 2.88% in females.When considered the bull alone in herds, it can be shown that fertility is much more important in males than in females individually, since bulls can mate with a much larger number of females, either in natural mating or in artificial insemination, demonstrating the importance of epidemiological survey in the general population, especially in males. The highest frequency of the disease was found in females and may be related to infection by Brucella spp. in the environment from childbirth or abortion making females permanent transmitters of the disease.

Identification of Brucella abortus biovar 4 of bovine origin in Colombia / Identificación de Brucella abortus biovar 4 de origen bovino en Colombia

The objective of this study was to identify twelve Brucella abortus isolates of bovine origin from the department of Nariño in Colombia up to the biovar level. These isolates are included in the collection of the Germplasm Bank of Microorganisms of Animal Health Interest -Bacteria and Virus (BGSA-BV). The identification was carried out through conventional methods such as macro and microscopic morphological descriptions, enzymatic activity, biochemical profile, substrate use and sensitivity to dyes. Complementary genotypic characterization was carried out using multiplex PCR for B. abortus, Brucella melitensis, Brucella ovis, and Brucella suis-Erytritol (AMOS-ERY-PCR), RFLP-IS711, by southern blot hybridization, as well as by the multiple locus variable number of tandem repeat analysis (MLVA) using the ery gene and the insertion sequence IS711 and variable number of tandem repeats (VNTR) as molecular markers. The results of the phenotypic and molecular characterization allowed to identify twelve isolates as B. abortus biovar 4 as well as to differentiate field from vaccine strains. This is the first study on the phenotypic and molecular identification of B. abortus isolates in Colombia. It was concluded that the phenotypic and molecular identification of twelve isolates as B. abortus biovar 4 could be achieved using conventional and molecular techniques with enough resolution power. The identification of these isolates to the biovar level in taxonomic and epidemiological terms will allow the use of this genetic resource as reference strains in future research. This finding constitutes the basis for identifying biotypes not previously reported in the country that might be useful to support brucellosis survey programs in Colombia.

El objetivo de este estudio fue identificar 12 aislamientos de Brucella abortus de origen bovino procedentes del departamento de Narino, Colombia, hasta la descripción de biovar. Estos aislamientos conforman la colección del Banco de Germoplasma de Microorganismos de Interés en Salud Animal, Bacterias y Virus. La identificación se hizo mediante métodos convencionales, como la descripción morfológica macro y microscópica de actividad enzimática, de perfiles bioquímicos, de utilización de sustratos y de sensibilidad a colorantes. Se hizo una caracterización genotipica complementaria mediante PCR múltiple para Brucella abortus, Brucella melitensis, Brucella ovisy Brucella suis-eritritol (AMOS-ERY-PCR); RFLP-/S7II; hibridación Southern blot y análisis multi-locus de repeticiones en tándem de número variable (MLVA), empleando como marcadores moleculares el gen ery, la secuencia de inserción /S711 y el número variable de repeticiones en tándem (VNTR). Los resultados de la caracterización fenotípica y molecular permitieron identificar 12 aislamientos de campo como B. abortus biovar 4 y diferenciar cepas de campo de cepas vacunales. Este es el primer estudio de identificación fenotípica y molecular de aislamientos de B. abortus en Colombia. Por su importancia taxonómica y epidemiológica, la identificación de estos aislamientos hasta el nivel de biovar permitirá disponer de recursos genéticos que se pueden emplear como cepas de referencia en futuras investigaciones. Estos resultados pueden considerarse como una base para la identificación de biotipos no reportados en el país y podrán ser utilizados en programas de monitoreo y vigilancia de la brucelosis bovina en Colombia.

Certificação e controle de propriedades de produção leiteira livres de brucelose e tuberculose no Estado do Rio de Janeiro: experiência da PESAGRO-RIO na primeira certificação do Estado, os benefícios ao pequeno produtor e a oferta de produtos lácteos de qualidade ao consumidor / Certification and control of brucellosis and tuberculosis free dairy production properties in the State of Rio de Janeiro: experience of PESAGRO-RIO in first certification of the State, the benefits to the small producer and the supply of dairy products of quality to the consumer

A cadeia leiteira do estado do Rio de Janeiro tem grande importância econômica e social. Existem, aproximadamente, 15 mil propriedades rurais produtoras de leite no estado, com 406 mil vacas ordenhadas ao ano, totalizando 45 mil pessoas diretamente ligadas ao leite somente no campo. Este contingente de produtores, produzindo cerca de 513 milhões de litros de leite por ano, gera faturamento anual de R$ 670 milhões no campo. Porém, o desenvolvimento da produção leiteira fluminense não acompanha o crescente mercado consumidor do estado. Os incentivos, por meio de políticas públicas que beneficiem a produção leiteira, sobretudo a familiar, que compreende mais de 78% dos estabelecimentos rurais do estado, devem-se basear principalmente no tripé sanidade, reprodução e nutrição animal, além de incentivos fiscais e de fortalecimento da indústria láctea. O conhecimento da frequência das doenças dos rebanhos leiteiros, dos fatores que condicionam sua presença e possibilitam sua difusão são de fundamental importância no seu controle e/ou erradicação, garantindo, assim, a produção de alimentos seguros, saudáveis e nutritivos, em bases sustentáveis e competitivas. O presente trabalho apresenta a experiência da Empresa de Pesquisa Agropecuária do Estado de Janeiro (PESAGRO-RIO) na certificação de propriedades livres de Brucelose e Tuberculose, pela implementação de ações de controle e erradicação dessas doenças, por meio do diagnóstico sorológico da Brucelose e pela detecção da Tuberculose em propriedades familiares. O projeto teve como resultado a certificação da primeira propriedade livre de Brucelose e Tuberculose do estado no município de Carmo e a elaboração de uma linha de produção de derivados lácteos com matéria-prima proveniente de propriedades certificadas. Os produtos foram identificados com o “Selo de Qualidade Sanitária”, como ferramenta de agregação de valor, tendo como resultado o aumento de renda dos produtores e a segurança alimentar dos consumidores.

Levantamento epidemiológico visando à comparação das prevalências de Brucelose bovina através de “Ring Test” no município de Carmo-RJ, após 9 anos de vacinação de bezerras de 3 a 8 meses de idade / Epidemiological survey to compare the prevalence of bovine Brucellosis through a Ring Test in the city of Carmo-RJ, after 9 years of vaccination of heifers from 3 to 8 months of age

A equipe técnica do Centro Estadual de Pesquisa em Sanidade Animal Geraldo Manhães Carneiro (CEPGM), da Empresa de Pesquisa Agropecuária do Estado do Rio de Janeiro (PESAGRO-RIO), realizou em 2009, levantamento epidemiológico para Brucelose através do teste de triagem Teste do Anel do Leite (TAL) no município de Carmo. Foram testados 30 tanques de expansão, entre eles, comunitários, da Cooperativa e Laticínio local e tanques individuais. Como resultado do teste realizado no CEPGM, observou-se a prevalência de 38% para Brucelose bovina no município, indicando expressiva necessidade de aplicação de medidas de profilaxia e controle. Assim, foi instituída vacinação gratuita no município, em março de 2009. Durante 9 anos e 6 meses ininterruptos, foram vacinadas 18.777 bezerras. Em agosto de 2018, um novo levantamento epidemiológico foi realizado, procurando atingir os mesmos pontos de coleta do levantamento de 2009. Foi observada a prevalência de 6,6% para Brucelose, representando a expressiva redução de 83% na prevalência da doença nos rebanhos do município em questão.

Analysis of the risk factors for bovine brucellosis in dairy herds of the Rio Branco microregion, Acre, Brazil / Análise dos fatores de risco para brucelose bovina em rebanhos leiteiros da microrregião de Rio Branco, Acre, Brasil

Bovine brucellosis (BB) is a compulsory notifiable bacterial disease caused by Brucella abortus, which is responsible for severe reproductive disorders in cattle, considerable damages to trade and public health damage. The objectives of this study were to identify the frequency of BB and to analyze the risk factors in the dairy herds of the Rio Branco microregion, in the state of Acre, Brazil. Thus, 527-bovine-serological samples were submitted to the buffered acidified antigen test and to 2-mercaptoethanol. Risk factors were characterized by the administration of epidemiological questionnaires. The logistic regression test was used to evaluate the existence of a significant association between the variables. The frequency of BB in the Rio Branco microregion was 10.6% (56/527). The inappropriate destination of the aborted fetus and placental remnants (odds ratio ­ OR = 13.6), the slaughter of cattle within the property (OR = 3.4) and the age range above 4 years old (OR = 2.9) were the most significant risk factors identified by the logistic regression model. According to the results of this study, it is recommended to intensify BB control and prophylaxis measures in the microregion of Rio Branco, especially those related to sanitary and reproductive management in the livestock breeding.(AU)

A brucelose bovina (BB) é uma bacteriose de notificação obrigatória, causada pela Brucella abortus, responsável por distúrbios reprodutivos graves em bovinos, prejuízos consideráveis ao comércio e agravos em saúde pública. Objetivaram-se com este estudo identificar a frequência de BB e analisar os fatores de risco nos rebanhos leiteiros da microrregião de Rio Branco, Acre. Assim, 527 amostras sorológicas de bovinos foram submetidas ao teste do antígeno acidificado tamponado e ao 2-mercaptoetanol. Os fatores de risco foram caracterizados por aplicação de questionários epidemiológicos. Utilizou-se o teste de regressão logística para avaliar a existência de associação significativa entre as variáveis. A frequência da BB na microrregião de Rio Branco foi de 10,6% (56/527). O destino inadequado do feto abortado e restos placentários (odds ratio ­ OR = 13,6), o abate de bovinos na propriedade (OR = 3,4) e a faixa etária acima de 4 anos (OR = 2,9) foram os fatores de risco mais significativos apontados pelo modelo de regressão logística. Conforme os resultados deste estudo, recomenda-se a intensificação nas medidas de controle e profilaxia da BB na microrregião de Rio Branco, sobretudo relacionadas ao manejo sanitário e reprodutivo nas criações.(AU)

Bovine brucellosis in slaughterhouses controlled by Federal and Municipal Inspection Services in the state of Maranhão, Brazil / Brucelose bovina em frigoríficos com Serviços de Inspeção Federal e Municipal no estado do Maranhão

The aims of the current study were to investigate the prevalence of bovine brucellosis, to correlate laboratory results of serum reactive samples to the serology of animals presenting serous pouches, and to identify possible risk factors for the development of the disease. In order to do so, 1,265 bovine blood samples were collected from male and female animals bred in different counties in Maranhão state, Brazil, and in other regions of the country. The animals were slaughtered in two slaughterhouses controlled by the Federal Inspection Service (FIS), and in two others controlled by the Municipal Inspection Service (MIS), of regions such as Açailândia and Imperatriz. Samples were tested for specific antibodies by using buffered acidified antigen (BAA) and 2-mercaptoethanol in combination with slow serum agglutination (2-ME + SSA). Additionally, an epidemiological questionnaire was applied to 100 owners, who provided animals to the slaughterhouses, to enable investigating the risk factors for bovine brucellosis. Fifteen serous pouches of animals presenting this lesion were also collected at slaughter time. Thirty-nine out of the analyzed samples were reacted to BAA, whereas 15 reacted to the 2-ME + SSA test; only one male was reagent and it resulted in 1.19% prevalence. One out of the 15 collected serous pouches reacted to the 2-ME + SSA test. The risk factors identified in this study were: the incidence of miscarriages, the sale of animals without previous examination, and the failure in testing the animals before introducing them in herds and before slaughter. It was possible to conclude that the animals slaughtered in the herein evaluated slaughterhouses were infected with Brucella abortus, as well as that this infection prevailed in females.(AU)

Os objetivos do estudo foram determinar a prevalência da brucelose bovina, relacionar resultados laboratoriais de amostras séricas reagentes com a sorologia de animais que apresentavam bursites e, ainda, identificar possíveis fatores de risco para a enfermidade. Para isso, no abate foram coletadas 1.265 amostras de sangue bovino, entre machos e fêmeas, procedentes de diferentes municípios maranhenses e de outras regiões do Brasil, abatidos em dois frigoríficos com Serviço de Inspeção Federal e dois com Serviço de Inspeção Municipal, nas regionais de Açailândia e Imperatriz. As amostras foram testadas para a presença de anticorpos específicos pelos testes do antígeno acidificado tamponado e 2-mercaptoetanol combinado à soroaglutinação lenta (2-ME + SAL). Para realizar o estudo dos fatores de risco, adicionalmente aplicou-se um questionário epidemiológico com 100 proprietários que forneceram animais aos frigoríficos. Foram também coletadas 15 amostras de material de bursite de animais que apresentaram a referida lesão no momento do abate. Do total de amostras analisadas, 39 foram reagentes ao antígeno acidificado tamponado e 15 foram confirmadas no 2-ME + SAL. Apenas um macho foi reagente, o que resultou em prevalência de 1,19%. Das 15 amostras de material de bursites coletadas, uma foi reagente no teste 2-ME + SAL. Os fatores de risco identificados no estudo foram: ocorrência de abortamentos, venda de animais sem exames e não realização de exames que atestem os animais antes da inclusão nos rebanhos para abate. Concluiu-se que a infecção por Brucella abortus em animais abatidos nos frigoríficos avaliados está presente e ocorre com maior frequência em fêmeas.(AU)

Prevalência de brucelose bovina na região noroeste do estado do Paraná de 2014 á 2016 / Bovine brucellosis prevalence in the northwest region of the state of Paraná from 2014 to 2016 / Prevalencia de brucelosis bovina en la región noroeste del estado de Paraná de 2014 a 2016

Dentre as zoonoses responsáveis pelas maiores perdas socioeconômicas na bovinocultura brasileira, a brucelose possui significativo destaque, sendo considerada uma antropozoonose causada pelas bactérias do gênero Brucella spp. Essas bactérias possuem potencial para infectar diversos mamíferos, inclusive, existem registros de brucelose em cetáceos (baleias e golfinhos). Nos bovinos, as principais maneiras de transmissão se dão pelas descargas bacterianas presentes nos restos de materiais provenientes de abortos de vacas positivas para brucelose, mas também pode ser transmitida pelo leite, cópula, fômites, solo e até a água. As vacas continuam liberando as bactérias por cerca de 30 dias após o parto ou aborto. Para diagnóstico são utilizados testes diretos ou indiretos preconizados pelo Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e da Tuberculose Animal (PNCEBT). O objetivo deste trabalho foi avaliar o perfil epidemiológico de Brucelose bovina na região noroeste do estado do Paraná de 2014 a 2016. Entre os anos de 2014 a 2016, foram utilizados dados de exames realizados por Médico Veterinário devidamente registrado e habilitado para a realização do diagnóstico. Entre bovinos machos e fêmeas foram testados 12.640 animais, na região noroeste do estado Paraná, sendo o teste utilizado o do antígeno acidificado tamponado (AAT). 26 animais foram positivos para brucelose, perfazendo um percentual de 0,2 % do rebanho analisado. Apesar dos baixos índices de animais infectados pela Brucella spp. apresentados nessa pesquisa o controle e uma possível erradicação da brucelose se tornam indispensáveis devido à fácil transmissão e às perdas econômicas provocadas, principalmente pelos abortos ocorridos nos últimos trimestres das gestações.(AU)

Brucellosis features among the zoonoses responsible for greatest socioeconomic losses in the Brazilian cattle farming. Considered an anthropozoonosis, its etiological agents are bacteria of the Brucella spp genus. Such bacteria have the potential to infect several mammals, with records of brucellosis even in cetaceans (whales and dolphins). In cattle, it is mainly transmitted through bacterial discharges present in the remains of materials coming from abortions tested positive for brucellosis. Nevertheless, it can also be transmitted by milk, copulation, blood transfusions, fomites, soil and even water. Cows continue releasing the bacteria for about 30 days after calving or abortion. Direct or indirect tests as recommended by the National Program for the Control and Eradication of Brucellosis and Animal Tuberculosis (PNCEBT) can be used for diagnosis. The objective of this study was to assess the epidemiological profile of bovine brucellosis in the northwestern region of the State of Paraná from 2014 to 2016. Between 2014 and 2016, data from examinations performed by a veterinarian duly registered and qualified to perform the diagnosis were used. A total of 12,640 animals in the northwest region of the state of Paraná were tested, both male and female, using the acidified buffered antigen (ABA). A total of 26 animals tested positive for brucellosis, which corresponds to 0.2% of the studied herd. Despite the low rates of animals infected with Brucella spp. presented in this study, the control and possible eradication of brucellosis is essential due to its easy transmission and extensive economic losses mainly caused by abortions occurring during the last quarters of pregnancies.(AU)

Entre las zoonosis responsables por las mayores pérdidas socioeconómicas en la bovinocultura brasileña, la brucelosis posee significativo destaque, es considerada una antropozoonosis causada por bacterias del género Brucella spp. Esas bacterias poseen potencial para infectar diversos mamíferos, incluso, existen registros de brucelosis en cetáceos (ballenas y delfines). En los bovinos, las principales formas de transmisión se dan por las descargas bacterianas presentes en los restos de materiales provenientes de abortos de vacas positivas para brucelosis, también puede ser transmitida por la leche, cópula, fómites, suelo e incluso el agua. Las vacas continúan liberando las bacterias durante unos 30 días después del parto o aborto. Para el diagnóstico se utilizan pruebas directas o indirectas preconizadas por el Programa Nacional de Control y Erradicación de Brucelosis y de la Tuberculosis Animal (PNCEBT). El objetivo de esta investigación ha sido evaluar el perfil epidemiológico de Brucelosis bovina en la región noroeste del estado de Paraná de 2014 a 2016. Entre los años de 2014 a 2016 se utilizaron datos de exámenes realizados por Médico Veterinario debidamente registrado y habilitado para la realización del diagnóstico. Entre bovinos machos y hembras se probaron 12.640 animales, en la región noroeste del estado de Paraná, la prueba utilizada fue antígeno acidificado tamponado (AAT). 26 animales atestaron positivos para brucelosis, lo que significó el 0,2% del rebaño analizado. A pesar de los bajos índices de animales infectados por Brucella spp. presentados en esa investigación, el control y una posible erradicación de la brucelosis se vuelven indispensables debido a su fácil transmisión y las pérdidas económicas provocadas, principalmente por los abortos ocurridos en los últimos trimestres de las gestaciones.(AU)

Cattle trade between and within biomes in the state of Mato Grosso, Brazil / Trânsito de bovinos entre e dentro dos biomas no estado de Mato Grosso, Brasil

The analysis of animal movement patterns may help identify farm premises with a potentially high risk of infectious disease introduction. Farm herd sizes and bovine movement data from 2007 in the state of Mato Grosso, Brazil, were analyzed. There are three different biomes in Mato Grosso: the Amazon, Cerrado, and Pantanal. The analysis of the animal trade between and within biomes would enable characterization of the connections between the biomes and the intensity of the internal trade within each biome. We conducted the following analyses: 1) the concentration of cattle on farm premises in the state and in each biome, 2) the number and relative frequency of cattle moved between biomes, and 3) the most frequent purposes for cattle movements. Twenty percent (20%) of the farm premises had 81.15% of the herd population. Those premises may be important not only for the spread of infectious diseases, but also for the implementation of surveillance and control strategies. Most of the cattle movement was intrastate (97.1%), and internal movements within each biome were predominant (88.6%). A high percentage of movement from the Pantanal was to the Cerrado (48.6%), the biome that received the most cattle for slaughter, fattening and reproduction (62.4%, 56.8%, and 49.1% of all movements for slaughter, fattening, and reproduction, respectively). The primary purposes for cattle trade were fattening (43.5%), slaughter (31.5%), and reproduction (22.7%). Presumably, movements for slaughter has a low risk of disease spread. In contrast, movements for fattening and reproduction purposes (66.2% of all movements) may contribute to an increased risk of the spread of infectious diseases.(AU)

A análise dos padrões de trânsito animal pode ajudar a identificar estabelecimentos sob um risco potencialmente maior de introdução de doença infecciosa. Foram analisadas a rede de trânsito de bovinos no estado do Mato Grosso, Brasil, e uma base de dados com tamanho de rebanho, ambas de 2007. Há três biomas diferentes em Mato Grosso: Amazônia, Cerrado e Pantanal. A análise do trânsito animal entre e dentro dos biomas nos permitiu caracterizar quão conectados são os biomas e quão intenso é o trânsito interno dentro de cada bioma. Conduzimos as seguintes análises: 1) se o rebanho bovino está concentrado em alguns estabelecimentos no estado todo e em cada bioma; 2) sobre o número absoluto e a frequência relativa de bovinos movimentados entre os biomas; e 3) quais são os propósitos mais frequentes para o trânsito animal. Encontramos que 20% dos estabelecimentos possuíam 81,15% do rebanho total do estado. Estes estabelecimentos podem ser importantes para o espalhamento de doenças infecciosas, mas também para a implementação de estratégias de vigilância e controle. A maior parte do trânsito foi dentro do estado (97,1%), e o trânsito interno dentro de cada bioma foi predominante (88,6%). Um percentual alto de movimentos do Pantanal (48,6%) foi para o Cerrado, o bioma que recebeu mais bovinos para abate, engorda e reprodução (62,4%, 56,8% e 49,1% de todos os movimentos para abate, engorda e reprodução, respectivemente). Os principais propósitos para o comércio de bovinos foram engorda (43,5%), abate (31,5%) e reprodução (22,7%). Movimentos para abate presumivelmente oferecem um baixo risco para espalhamento de doença. Em contraste, movimentos para engorda e reprodução (66,2% de todos os movimentos) podem contribuir para o aumento do risco de espalhamento de doenças infecciosas.(AU)

Brucellosis and tuberculosis in cattle in South America / Brucelose e tuberculose bovinas na América do Sul

In general, European and North American countries, as well as Australia and New Zealand, have already eradicated or reached good levels of control of brucellosis and tuberculosis in cattle. In the rest of the world, however, the epidemiological situation of these two diseases is frequently poorly understood. In this review article, quantified data on these diseases in the South American countries are presented. Initially, the aspects that led the continent to host 25% of the world cattle population are presented, in addition to the aspects that placed the continent at a prominent position in the international meat market. Subsequently the continent was divided into three country groups, considering the size of the cattle population and how well the epidemiological situation of brucellosis and tuberculosis in cattle is quantified. It is argued that countries that do not generate high-quality quantitative epidemiological data on these diseases have serious limitations in outlining and managing control or eradication strategies. Thus, for successful outcomes, at least methodologies to estimate the prevalence of infected herds should be employed.(AU)

De maneira geral, os países da Europa e da América do Norte, além da Austrália e da Nova Zelândia, já erradicaram ou atingiram bons níveis de controle da brucelose e da tuberculose bovinas. Entretanto, no restante do mundo, raramente a situação epidemiológica dessas duas doenças é adequadamente conhecida. Neste artigo de revisão são apresentados dados de quantificação dessas importantes enfermidades nos países da América do Sul. Inicialmente são apresentadas as características que concorreram para que atualmente o continente tenha 25% do efetivo bovino mundial e uma posição de destaque no mercado internacional de carnes. Os países foram então alocados em três grupos, levando em consideração o tamanho da população bovina e a qualidade da quantificação referente à situação epidemiológica da brucelose e da tuberculose bovinas. Argumenta-se que países que não geram dados epidemiológicos quantitativos de alta qualidade em relação a essas doenças têm sérias limitações para traçar estratégias eficazes de combate e são incapazes de realizar a gestão dos processos. Conclui-se que os países que desejam ser exitosos no combate à brucelose e tuberculose bovinas deveriam ao menos utilizar metodologias para estimar a prevalência de focos.(AU)

Ocorrência de brucelose e tuberculose bovinas no Rio Grande do Sul com base em dados secundários / Occurrence of bovine brucellosis and tuberculosis in Rio Grande do Sul, Brazil, based on secondary data

Avaliaram-se os resultados de testes para diagnóstico da brucelose e tuberculose bovinas objetivando analisar a distribuição de positividade e características de performance do programa de controle. A análise utilizou como dados secundários todos os resultados de testes para diagnóstico realizados em bovinos no ano de 2008 no estado do Rio Grande do Sul (RS) por médicos veterinários habilitados para atuação no âmbito do Programa Nacional de Controle e Erradicação de Brucelose e Tuberculose Animal. Os dados foram estatisticamente ajustados para minimizar os efeitos de valores extremos e de dados faltantes. Os testes alcançaram 66,80% dos 497 municípios do RS e incluíram a participação de 165 médicos veterinários habilitados. 40,21% dos testes foram realizados nos meses de abril, setembro e outubro, sendo que em 73,90% dos estabelecimentos foram realizados testes para ambas as enfermidades. No caso da brucelose verificou-se que foram testados 35.289 animais, com uma frequência de positivos de 0,25%, enquanto a frequência de estabelecimentos positivos entre os 3.406 testados foi 0,94%. Fêmeas apresentaram frequência de positividade mais elevada (0,29%, de 26.724 testadas) do que machos (0,13%, de 5.235 testados). Animais entre 48-60 meses de idade apresentaram chance de positividade superior às demais faixas etárias (Razão de Chances (RC) =2,63; IC 95%=1,63-4,26). Animais de aptidão leiteira representaram 62,66% dos animais testados, e apresentaram maior chance de positividade do que animais de corte (RC=2,32; IC 95%=1,38-3,90). Adicionalmente, 73,74% dos estabelecimentos testados eram dedicados à produção de leite. Já no caso da tuberculose foram testados 62.149 animais distribuídos em 5.151 propriedades, com frequência de positivos de 0,87% e 3,13%, respectivamente. A chance de positividade aumentou com a idade, sendo que animais com idade acima de 48 meses de idades apresentaram valores superiores aqueles verificados em animais mais jovens (RC=2,07; IC 95%=1,73-2,48). 59,74% dos animais testados eram de aptidão leiteira, os quais apresentaram mais chance de serem positivos do que aqueles de corte (RC=5,03; IC 95%=4,09-6,94). Propriedades leiteiras representaram 78,50% da totalidade dos testes para tuberculose. A análise comparativa do presente trabalho com estudos precedentes de prevalência da brucelose sugere que as ações de controle em curso têm sido efetivas na redução da prevalência da enfermidade no RS. Por outro lado, as informações obtidas no âmbito da tuberculose podem ser indicadoras da condição desta enfermidade, especialmente pela inexistência de estudos de prevalência realizados há menos de 30 anos. Adicionalmente, conclui-se que a utilização de dados secundários, desde que devidamente ajustados, pode ser uma ferramenta eficaz na gestão de programas de saúde animal e em sistemas de monitoramento e vigilância.(AU)

Results of tests for the diagnosis of bovine brucellosis and tuberculosis were evaluated aiming to analyze the distribution of positivity and characteristics of performance of the control program. The analysis used as secondary data the results of all diagnostic tests of bovines executed in 2008 in the state of Rio Grande do Sul (RS) by veterinarians authorized to operate under the National Program for Control and Eradication of Animal Brucellosis and Tuberculosis. The data were statistically adjusted to minimize the effect of outliers and missing data. The tests achieved 66.80% of the 497 municipalities in the RS and included the participation of 165 authorized veterinarians. 40.21% of tests were carried out in the months of April, September and October, and in 73.90% of establishments had tests performed for both diseases. In the case of brucellosis it appeared that 35,289 animals were tested, with positivity of 0.25%, while the frequency of positive holdings among the 3,406 tested was 0.94%. Females had higher positivity rate (0.29% of 26,724 tested) than males (0.13% of 5,235 tested). Animals between 48-60 months of age presented higher chance of positivity compared to other age groups (Odds Ratio (OR) = 2.63; CI 95% = 1.63 - 4.26). Dairy cattle represented 62.66% of tested animals, which were more likely to appear as positive than beef animals (OR = 2.32; CI 95% = 1.38 - 3.90). In addition, 73.74% of the tested holdings were dairy ones. In the case of tuberculosis, 62,149 animals were tested, distributed in 5,151 holdings, with positivity of 0.87% and 3.13%, respectively. The chance of positivity increased with age, being that animals older than 48 months presented higher values compared to ​​those found in younger animals (OR = 2.07; CI 95% = 1.73 - 2.48). Dairy cattle represented 59.74% of tested animals, which were more likely to be positive than beef ones (OR = 5.03; CI 95% = 4.09 - 6.94). Dairy holdings were 78.50% of all the tests for tuberculosis. The comparative analysis of this study with previous studies on brucellosis prevalence suggested that current control measures have been effective in reducing the prevalence of this disease in RS. On the other hand, information obtained on tuberculosis can be indicators of the condition of this disease, especially in the lack of prevalence studies carried out in the last 30 years. Finally, it is concluded that the use of secondary data, if properly adjusted, can be an effective tool in the management of animal health programs and monitoring and surveillance systems.(AU)

Isolation and identification of Mycobacterium bovis in bovines with positive reaction to the tuberculin test in the state of Paraíba, northeast Brazil / Isolamento e identificação de Mycobacterium bovis em bovinos positivos no teste de tuberculinização no estado da Paraíba, nordeste do Brasil

In areas where human tuberculosis and bovine tuberculosis coexist, differentiation between M. bovis and M. tuberculosis is important for monitoring the spread of M. bovis among cattle and from cattle to humans. The objective of this study was to isolate and identify M. bovis in bovines with positive diagnosis identified on tuberculin test in the State of Paraíba, Northeastern Brazil. Thirty-two bovines that tested positive in the comparative tuberculin test were used, from which samples of any organ with lesions suggestive of tuberculosis were collected, as well as lymph nodes, when no gross lesions were observed. Samples were submitted to histopathological exam, mycobacterial culture, Ziehl-Neelsen staining and molecular diagnosis. Twenty-one (65.6%) animals presented lesions suggestive of tuberculosis. As to body region 77.7% of lesions were found in the thoracic cavity, 12.4% in the head and 9.9% in the abdominal cavity. Among 55 samples submitted to mycobacterial culture, mycobacteria were isolated in 31 (56.4%), being 13 (41.9%) identified as M. bovis and 18 (58.1%) as Mycobacterium spp. Conclusion is that isolation and identification of M. bovis and Mycobacterium spp. in cattle suggests that humans are exposed to the risk of infection. This reinforces the need for intensification and optimization of prevention and control measures foreseen in the Brazilian National Program for the Control and Eradication of Bovine Brucellosis and Tuberculosis. Mycobacteria isolation and identification surveys are, therefore, encouraged in other Northeastern states.(AU)

Em áreas onde a tuberculose humana e a tuberculose bovina coexistem, a diferenciação entre M. bovis e M. tuberculosis é importante para monitorar a disseminação de M. bovis entre bovinos e destes para os seres humanos. Objetivou-se neste estudo isolar e identificar M. bovis em bovinos com diagnóstico positivo pelo teste de tuberculinização no estado da Paraíba, nordeste do Brasil. Foram submetidos 32 bovinos positivos ao teste de tuberculinização comparativa, dos quais foram colhidas amostras de qualquer órgão com lesões sugestivas de tuberculose, e, nos casos em que não foram observadas lesões sugestivas, foram colhidas amostras de linfonodos. As amostras foram submetidas a exame histopatológico, cultivo micobacteriológico, coloração de Ziehl-Neelsen e diagnóstico molecular. Apresentaram lesões sugestivas de tuberculose 21 animais (65,6%). Com relação à distribuição das lesões de acordo com a região corporal, 77,7% localizavam-se na cavidade torácica, 12,4% na cabeça e 9,9% na cavidade abdominal. De 55 amostras submetidas ao cultivo de micobactérias, em 31 (56,4%) foram isoladas micobactérias, sendo que em 13 (41,9%) foi identificado M. bovis, e nas 18 restantes (58,1%) foi identificado Mycobacterium spp. Conclui-se que o isolamento e a identificação de M. bovis e Mycobacterium spp. em bovinos indicam que os seres humanos estão expostos ao risco de infecção. Isso reforça a necessidade de intensificação e otimização de medidas de prevenção e controle previstas no Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose Bovina. Sugere-se a realização de estudos de isolamento e identificação de micobactérias em outros estados do Nordeste.(AU)

Avaliação das técnicas de imunodifusão em gel de ágar, ensaio imunoenzimático indireto e reação em cadeia da polimerase no diagnóstico da brucelose ovina / Evaluation of technical, immunodiffusion agar gel, enzyme-linked immunosorbent assay and polymerase chain reaction in the diagnosis of ovine brucellosis

A brucelose na espécie ovina tem recebido destaque, uma vez que se trata de uma enfermidade que acomete o sistema reprodutivo dos animais, provocando sério comprometimento no setor produtivo. Dessa forma, objetivou-se a avaliação de três métodos para o diagnóstico da brucelose ovina: o ensaio imunoenzimático indireto (ELISAi), a técnica imunodifusão em gel de ágar (IDGA) e a reação em cadeia da polimerase (PCR). Para tanto, utilizaram-se 211 amostras de sangue de ovinos oriundos de propriedades de nove municípios da microrregião homogênea de Teresina, Piauí. As 211 amostras de sangue foram submetidas aos testes sorológicos e à PCR, visando detectar anticorpos anti-B. ovis e DNA de Brucella ovis, respectivamente. Foram obtidos resultados positivos nos testes sorológicos, sendo 36 (17,06%) positivos no teste IDGA e sete (3,31%) positivos no teste ELISAi, contudo não houve resultados positivos na técnica de PCR. Dos métodos de diagnóstico utilizados neste estudo, o teste IDGA foi o que apresentou melhor desempenho na detecção de animais reagentes, quando comparado ao teste ELISAi e à PCR em amostras de sangue, e o percentual de animais soropositivos sugere uma ampla distribuição de ovinos infectados por Brucella ovis na região em estudo, o que pode causar prejuízos aos produtores.(AU)

Brucellosis in sheep has received a major focus, since it is a disease that affects the reproductive system of animals, causing serious impairment in the productive sector. Thus, three methods for the diagnosis of ovine brucellosis were evaluated as goal, the indirect Linked Immunosorbent Assay (ELISAi) test, the Immunodiffusion Agar Gel (AGID) technique and the Polymerase Chain Reaction (PCR). Therefore, we used 211 sheep blood samples from properties of nine municipalities of the homogeneous micro-region of Teresina, Piaui. The 211 blood samples were subjected to serologic testing and PCR to detect anti-B. ovis antibodies, and Brucella ovis DNA, respectively. Positive results in serological tests were obtained, 36 (17%) positive in the AGID test and seven (3.3%) positive to the ELISAi test, however, there were no positive results in the PCR technique. Of the diagnostic methods used in this study, the AGID test was the one that presented the best performance in the detection of reactive animals, when compared to ELISAi and PCR in blood samples and, the percentage of seropositive animals suggests a wide distribution of Brucella ovis infected sheep in the study region and could cause loss to producers.(AU)

Ocorrência da brucelose e tuberculose bovina e percepção de riscos no Mato Grosso do Sul, Brasil / Occurrence of brucellosis and bovine tuberculosis and risk perception in Mato Grosso do Sul, Brazil

Determinar a ocorrência da brucelose, da tuberculose e a percepção de riscos acerca de ambas as zoonoses foi o objetivo do estudo em rebanhos bovinos leiteiros do município de Paranaíba, Mato Grosso do Sul, Brasil. As visitas ocorreram entre novembro de 2012 e março de 2013, em 42 propriedades georreferenciadas, nas quais foram aplicados questionários aos produtores e realizadas as coletas de sangue para testes sorológicos e de tuberculinização. A ocorrência de focos, tanto da brucelose quanto da tuberculose, nas propriedades foi de 2,38% (1/42), porém, há um baixo conhecimento dos produtores sobre os fatores de risco para essas doenças.(AU)

The aim of these study was to determine the occurrences of brucellosis and bovine tuberculosis, and the perception of dairy farmers on the risk of these diseases in dairy cattle herds in the municipality of Paranaíba, Mato Grosso do Sul state, Brazil. The total of 42 properties were visited for the application of a questionnaire to dairy farmers, and blood sample collection for serological and tuberculin test, from November 2012 to March 2013. The occurrence of outbreaks, both of brucellosis and tuberculosis, in the properties was 2.38% (1/42). The data showed deficiency in risk perception of these diseases on the part of the farmers.(AU)

Review of Brucellosis in Nepal / 한국역학회지

OBJECTIVES: The aim of this paper is to evaluate the current status of the disease, the mechanism of infection, and pathogenesis, its zoonotic potential, diagnostic advances, treatment regimens, and the preventive measures that can be adopted in managing human brucellosis in under-developed countries such as Nepal. METHODS: We performed a systematic review of all the available literture through Google Scholar, PubMed, Gideon Informatics, World Health Organization and other legitimate sources. Other secondary informations were collected from the government agencies such as department of livestock services and Ministry of Health. The obtained information was then re-analysed and summarized. RESULTS: Few publications have addressed brucellosis in Nepal and most of those publications have focused on bovine brucellosis with sparse information available on brucellosis in humans and small ruminants. Brucella abortus is the most predominant causative agent followed by B. suis. B. abortus is predominant in cattle accounting for a substantial portion of bovine abortion in the country. Lack of awareness, unhealthy food habit, traditional husbandry practices, and a lack of surveillance and immunization have been the major factors in maintaining a vicious cycle of propagation of the disease in human and animals. Unfortunately, nothing has been done to identify the species of Brucella at the biovar level. CONCLUSIONS: Although brucellosis has been reported to be endemic in Nepal, neither the distribution nor the economic and public health impact of this disease is well characterized. Robust and well-designed nationwide survey is warranted to assess the prevalence and distribution of disease in livestock and humans. Such data would facilitate the design of appropriate control programmes.

Detecção de Brucella spp. em leite bovino não pasteurizado através da Reação de Cadeia pela Polimerase (PCR) / Detection of Brucella spp. in unpasteurized cow milk by polymerase chain reaction (PCR)

A brucelose é uma importante zoonose causada por bactérias do gênero Brucella. O homem é infectado pelo contato com as secreções reprodutivas como placenta, lóquios placentários, sêmen e secreções penianas de animais infectados ou pelo consumo de leite e derivados não pasteurizados. Com o objetivo de pesquisar a presença da bactéria no leite, foram avaliadas, através da técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR), 30 amostras de leite cru comercializadas clandestinamente na região de Botucatu, São Paulo, bem como 50 amostras de leite entregues em laticínio, previamente à pasteurização. Das 80 amostras analisadas pela técnica de PCR, 10 (12,5%) foram positivas e 70 (87,5%) negativas. Dentre as amostras positivas, 5 amostras (16,6%) eram provenientes de comerciantes ilegais e outras 5 amostras (10%) foram obtidas no laticínio. A positividade para Brucella spp. demonstra que o patógeno se encontra presente de forma importante na região de Botucatu, São Paulo, e que o risco associado à saúde pública devido à comercialização de produtos clandestinos sem prévia pasteurização é real.(AU)

Brucellosis is a zoonosis caused by bacteria of the genus Brucella. Man infection occurs through contact with reproductive secretions as placenta and its lochia, semen and penile secretion of infected animals or by consuming unpasteurized milk and dairy products. With the objective of investigating the presence of bacteria in milk, 30 samples of raw milk sold illegally in the region of Botucatu, São Paulo, Brazil, as well as 50 samples of milk delivered to a dairy industry previously to its pasteurization were evaluated by the polymerase chain reaction (PCR) technique. Of the 80 samples analyzed, 10 samples (12.5%) were positive and 70 (87.5%) were negative. Among the positive samples, 5 (16.6%) were from illegal traders and other 5 (10%) were obtained from the dairy industry. Brucella spp. positivity shows that the pathogen is representatively present in Botucatu, São Paulo, Brazil, and the risk associated to public health due to the commercialization of illegal products without pasteurization is real.(AU)

Detecção de Brucella abortus em tecidos bovinos utilizando ensaios de PCR e qPCR / Detection of Brucella abortus in bovine tissue using PCR and qPCR

Objetivou-se no presente estudo avaliar as técnicas reação em cadeia da polimerase (PCR) e PCR em Tempo Real (qPCR) para detectar Brucella abortus, a partir de tecidos bovinos com lesões sugestivas de brucelose. Para isto, 21 fragmentos de tecidos bovinos coletados em abatedouros de Mato Grosso do Sul foram processados e submetidos ao cultivo microbiológico e extração do DNA genômico para realização das reações de PCR e qPCR. No cultivo microbiológico, oito amostras apresentaram crescimento bacteriano e cinco foram confirmadas como B. abortus por PCR. Diretamente das amostras de tecido, DNA do gênero Brucella (oligonucleotídeos IS711) foi detectado em 13 (61,9 por cento) amostras de tecido e 17 (81 por cento) amostras de homogeneizado. Já com os oligonucleotídeos espécie-específicos BruAb2_0168F e BruAb2_0168R, 14 (66 por cento) amostras de tecido e 18 (85,7 por cento) amostras de homogeneizado foram amplificadas. Seis amostras positivas na PCR espécie-específica foram sequenciadas e o best hit na análise BLASTn foi B. abortus. Na qPCR, 21 (100 por cento) amostras de tecidos e 19 (90,5 por cento) amostras de homogeneizado foram positivas para B. abortus. Dez amostras de DNA de sangue bovino de rebanho certificado livre foram utilizadas como controle negativo nas análises de PCR e qPCR utilizando-se os oligonucleotídeos BruAb2_0168F e BruAb2_0168R. Na PCR nenhuma amostra amplificou, enquanto que na qPCR 2 (20 por cento) amplificaram. Conclui-se que as duas técnicas detectam a presença de B. abortus diretamente de tecidos e homogeneizados, porém a qPCR apresentou maior sensibilidade. Os resultados obtidos indicam que a qPCR pode representar uma alternativa rápida e precisa para a detecção de B. abortus diretamente de tecidos, e ser utilizada em programas de vigilância sanitária, por apresentar sensibilidade e especificidade satisfatórias.

The aim of the study was to evaluate the technical polymerase chain reaction (PCR) and Real-Time PCR (qPCR) to detect Brucella abortus from bovine tissues with suggestive lesions of brucellosis. For this, 21 fragments of bovine tissues collected at abattoirs of Mato Grosso do Sul were processed and subjected to microbiological culture and extraction of genomic DNA to perform the PCR reactions and qPCR. Eight samples of microbiological culture showed bacterial growth and five samples were confirmed as B. abortus by PCR. DNA of Brucella (IS711 primers) was detected in 13 (61.9 percent) directly from tissue samples and 17 (81 percent) from tissue homogenate samples. With the species-specific set of primers BruAb2_0168F and BruAb2_0168R, 14 (66 percent) tissue samples and 18 (85.7 percent) tissue homogenate samples were positive. Six positive samples in the species-specific PCR were sequenced and the best hit in the BLASTn analysis was B. abortus. By qPCR, 21 (100 percent) tissue samples and 19 (90.5 percent) tissue homogenate samples were positive for B. abortus. Ten samples of DNA from bovine blood from an accredited-free herd were used as negative control in PCR and qPCR analysis using the primers BruAb2_0168F and BruAb2_0168R, and no one amplified by PCR, whereas two samples were amplified by qPCR (20 percent). In conclusion, both techniques detect the presence of B. abortus directly from tissues and homogenized, but the qPCR showed high sensitivity. The results indicate that qPCR can represent an alternative tool for faster and more accurate detection of B. abortus directly from tissues, and use in health surveillance programs by presenting satisfactory sensitivity and specificity.